-
Minyak esensial daun Eucalyptus aromaterapi murni alami untuk perawatan kulit dan tubuh
Metode Ekstraksi atau Pengolahan: suling uap
Distilasi Ekstraksi bagian: daun
Asal negara: Tiongkok
Aplikasi: Difusi/aromaterapi/pijat
Umur simpan: 3 tahun
Layanan yang disesuaikan: label dan kotak khusus atau sesuai kebutuhan Anda
Sertifikasi: GMPC/FDA/ISO9001/MSDS/COA
Minyak kayu putih bereaksi dengan lendir dan mengencerkannya untuk meredakan sesak napas dan masalah pernapasan lainnya secara instan. Minyak ini cukup ampuh untuk digunakan sebagai pengusir serangga. Ketika digunakan dalam aromaterapi, minyak ini memberikan kejernihan pikiran. Manfaat terapeutiknya berasal dari sifat antimikroba, antibakteri, antiseptik, antispasmodik, dan antivirusnya. Gunakan minyak kayu putih untuk mengatasi berbagai kondisi kulit dan kesehatan. Minyak ini mengandung eukaliptol yang juga dikenal sebagai sineol. Senyawa ini akan mendukung kesehatan dan kebugaran Anda secara keseluruhan.
-
Minyak Esensial Lavender Organik Murni Alami untuk perawatan kulit Aromaterapi
Metode Ekstraksi atau Pengolahan: Distilasi uap
Distilasi Ekstraksi bagian: Bunga
Asal negara: Tiongkok
Aplikasi: Difusi/aromaterapi/pijat
Umur simpan: 3 tahun
Layanan yang disesuaikan: label dan kotak khusus atau sesuai kebutuhan Anda
Sertifikasi: GMPC/FDA/ISO9001/MSDS/COA
-
Minyak Esensial Magnoliae Officmalis Cortex 100% Murni Alami dan Organik untuk Perawatan Kulit
Aroma Hou Po langsung terasa pahit dan tajam, lalu secara bertahap terbuka dengan rasa manis dan hangat yang dalam.
Hou Po memiliki afinitas terhadap elemen Tanah dan Logam, di mana kehangatan pahitnya berperan kuat dalam menurunkan Qi dan kelembapan kering. Karena sifat-sifat ini, Hou Po digunakan dalam pengobatan Tiongkok untuk meredakan stagnasi dan penumpukan dahak di saluran pencernaan serta batuk dan mengi akibat dahak yang menyumbat paru-paru.
Magnolia Officinials adalah pohon peluruh yang berasal dari pegunungan dan lembah Sichuan, Hubei, dan provinsi-provinsi lain di Tiongkok. Kulit kayunya yang sangat aromatik, yang digunakan dalam pengobatan tradisional Tiongkok, dipetik dari batang, cabang, dan akarnya. Dipetik selama bulan April hingga Juni. Kulit kayunya yang tebal dan halus, kaya minyak, memiliki warna keunguan di bagian dalam dengan kilau seperti kristal.
Praktisi dapat mempertimbangkan untuk menggabungkan Hou Po dengan minyak esensial Qing Pi sebagai pelengkap nada atas dalam campuran yang ditujukan untuk memecah akumulasi.
-
Paket Kustom OEM Minyak Makrocephalae Rhizoma Alami
Sebagai agen kemoterapi yang efisien, 5-fluorouracil (5-FU) banyak digunakan untuk pengobatan tumor ganas di saluran cerna, kepala, leher, dada, dan ovarium. 5-FU merupakan obat lini pertama untuk kanker kolorektal di klinik. Mekanisme kerja 5-FU adalah dengan menghambat transformasi asam nukleat urasil menjadi asam nukleat timin di dalam sel tumor, kemudian memengaruhi sintesis dan perbaikan DNA dan RNA untuk mencapai efek sitotoksiknya (Afzal dkk., 2009; Ducreux dkk., 2015; Longley dkk., 2003). Namun, 5-FU juga menyebabkan diare akibat kemoterapi (CID), salah satu reaksi merugikan paling umum yang dialami banyak pasien (Filho dkk., 2016). Insiden diare pada pasien yang diobati dengan 5-FU mencapai 50%–80%, yang secara signifikan memengaruhi kemajuan dan efikasi kemoterapi (Iacovelli dkk., 2014; Rosenoff dkk., 2006). Oleh karena itu, sangat penting untuk menemukan terapi yang efektif untuk CID yang diinduksi 5-FU.
Saat ini, intervensi non-obat dan intervensi obat telah diimpor ke dalam pengobatan klinis CID. Intervensi non-obat termasuk diet yang wajar, dan suplemen dengan garam, gula dan nutrisi lainnya. Obat-obatan seperti loperamide dan octreotide umumnya digunakan dalam terapi anti-diare CID (Benson et al., 2004). Selain itu, etnomedicine juga diadopsi untuk mengobati CID dengan terapi unik mereka sendiri di berbagai negara. Pengobatan tradisional Tiongkok (TCM) adalah salah satu etnomedicine khas yang telah dipraktikkan selama lebih dari 2000 tahun di negara-negara Asia Timur termasuk Tiongkok, Jepang dan Korea (Qi et al., 2010). TCM berpendapat bahwa obat kemoterapi akan memicu konsumsi Qi, defisiensi limpa, ketidakharmonisan lambung dan kelembapan endofit, yang mengakibatkan disfungsi konduktif usus. Dalam teori TCM, strategi pengobatan CID harus terutama bergantung pada suplementasi Qi dan penguatan limpa (Wang et al., 1994).
Akar kering dariAtractylodes macrocephalaKoidz. (AM) danPanax ginsengCA Mey. (PG) adalah obat herbal umum dalam TCM dengan efek yang sama dalam meningkatkan Qi dan memperkuat limpa (Li dkk., 2014). AM dan PG biasanya digunakan sebagai pasangan herbal (bentuk kompatibilitas herbal Tiongkok yang paling sederhana) dengan efek meningkatkan Qi dan memperkuat limpa untuk mengobati diare. Misalnya, AM dan PG telah didokumentasikan dalam formula antidiare klasik seperti Shen Ling Bai Zhu San, Si Jun Zi Tang dariTaiping Huimin Heji Ju Fang(Dinasti Song, Tiongkok) dan Bu Zhong Yi Qi Tang dariPi Wei Lun(Dinasti Yuan, Tiongkok) (Gbr. 1). Beberapa penelitian sebelumnya telah melaporkan bahwa ketiga formula tersebut memiliki kemampuan untuk meredakan CID (Bai dkk., 2017; Chen dkk., 2019; Gou dkk., 2016). Selain itu, penelitian kami sebelumnya menunjukkan bahwa Kapsul Shenzhu yang hanya mengandung AM dan PG memiliki potensi efek pada pengobatan diare, kolitis (sindrom xiexie), dan penyakit gastrointestinal lainnya (Feng dkk., 2018). Namun, belum ada penelitian yang membahas efek dan mekanisme AM dan PG dalam mengobati CID, baik dalam kombinasi maupun tunggal.
Sekarang mikrobiota usus dianggap sebagai faktor potensial dalam memahami mekanisme terapi TCM (Feng et al., 2019). Studi modern menunjukkan bahwa mikrobiota usus memainkan peran penting dalam menjaga homeostasis usus. Mikrobiota usus yang sehat berkontribusi pada perlindungan mukosa usus, metabolisme, homeostasis dan respons imun, dan penekanan patogen (Thursby dan Juge, 2017; Pickard et al., 2017). Mikrobiota usus yang terganggu merusak fungsi fisiologis dan imun tubuh manusia secara langsung atau tidak langsung, yang memicu reaksi samping seperti diare (Patel et al., 2016; Zhao dan Shen, 2010). Penelitian telah menunjukkan bahwa 5-FU secara signifikan mengubah struktur mikrobiota usus pada tikus diare (Li et al., 2017). Oleh karena itu, efek AM dan PM pada diare yang diinduksi 5-FU dapat dimediasi oleh mikrobiota usus. Namun, apakah AM dan PG sendiri atau dalam kombinasi dapat mencegah diare yang disebabkan oleh 5-FU dengan memodulasi mikrobiota usus masih belum diketahui.
Untuk menyelidiki efek anti-diare dan mekanisme yang mendasari AM dan PG, kami menggunakan 5-FU untuk mensimulasikan model diare pada tikus. Di sini, kami berfokus pada potensi efek pemberian tunggal dan kombinasi (AP)Atractylodes macrocephalaminyak atsiri (AMO) danPanax ginsengtotal saponin (PGS), komponen aktif yang masing-masing diekstraksi dari AM dan PG, pada diare, patologi usus dan struktur mikroba setelah kemoterapi 5-FU.
-
Minyak Esensial Daun Eucommiae 100% Murni Alami untuk Perawatan Kulit
Eucommia ulmoides(EU) (umumnya disebut “Du Zhong” dalam bahasa Cina) termasuk dalam keluarga Eucommiaceae, genus pohon kecil asli Cina Tengah [1]. Tanaman ini dibudidayakan secara luas di Tiongkok dalam skala besar karena manfaatnya sebagai obat. Sekitar 112 senyawa telah diisolasi dari EU, termasuk lignan, iridoid, fenolik, steroid, dan senyawa lainnya. Formula herbal pelengkap tanaman ini (seperti teh yang lezat) telah menunjukkan beberapa khasiat obat. Daun EU memiliki aktivitas yang lebih tinggi terkait dengan korteks, bunga, dan buah [2,3]. Daun eucalyptus dilaporkan dapat meningkatkan kekuatan tulang dan otot tubuh [4], sehingga dapat memperpanjang umur dan meningkatkan kesuburan pada manusia [5Formula teh lezat yang terbuat dari daun teh EU dilaporkan dapat mengurangi lemak dan meningkatkan metabolisme energi. Senyawa flavonoid (seperti rutin, asam klorogenat, asam ferulat, dan asam kafeat) telah dilaporkan menunjukkan aktivitas antioksidan dalam daun teh EU.6].
Meskipun telah terdapat cukup banyak literatur tentang sifat fitokimia KAYU, masih sedikit penelitian yang membahas sifat farmakologis berbagai senyawa yang diekstrak dari kulit kayu, biji, batang, dan daun KAYU. Makalah tinjauan ini akan menguraikan informasi detail mengenai berbagai senyawa yang diekstrak dari berbagai bagian (kulit kayu, biji, batang, dan daun) KAYU dan prospek penggunaan senyawa-senyawa ini dalam hal khasiatnya yang meningkatkan kesehatan dengan bukti ilmiah, sehingga dapat menjadi bahan referensi untuk aplikasi KAYU.
-
Minyak Houttuynia cordata murni alami, minyak Houttuynia cordata, minyak Lchthammolum
Di sebagian besar negara berkembang, 70-95% penduduk mengandalkan obat tradisional untuk perawatan kesehatan primer dan dari jumlah tersebut 85% orang menggunakan tanaman atau ekstraknya sebagai zat aktif.1Pencarian senyawa aktif biologis baru dari tumbuhan biasanya bergantung pada informasi etnis dan masyarakat setempat yang diperoleh dari praktisi lokal dan masih dianggap sebagai sumber penting untuk penemuan obat. Di India, sekitar 2000 obat berasal dari tumbuhan.2] Mengingat tingginya minat terhadap penggunaan tanaman obat, ulasan ini mengenaiHouttuynia cordataThunb. menyediakan informasi terkini dengan mengacu pada studi botani, komersial, etnofarmakologi, fitokimia dan farmakologi yang muncul dalam literatur.H. cordataThunb. termasuk dalam keluargaSaururaceaedan umumnya dikenal sebagai ekor kadal Cina. Ini adalah herba tahunan dengan rimpang berstolonifera yang memiliki dua kemotipe berbeda.3,4] Kemotipe Cina dari spesies ini ditemukan dalam kondisi liar dan semi-liar di Timur Laut India dari bulan April hingga September.[5,6,7]H. cordatatersedia di India, terutama di lembah Brahmaputra Assam dan dimanfaatkan oleh berbagai suku Assam dalam bentuk sayuran serta dalam berbagai tujuan pengobatan tradisional.
-
Produsen Minyak Arctium lappa 100% Murni – Minyak Arctium lappa Jeruk Nipis Alami dengan Sertifikat Jaminan Kualitas
Manfaat Kesehatan
Akar burdock sering dimakan, namun juga bisa dikeringkan dan diseduh menjadi teh. Akar ini berfungsi baik sebagai sumber inulin, suatuprebiotikserat yang membantu pencernaan dan meningkatkan kesehatan usus. Selain itu, akar ini mengandung flavonoid (nutrisi tanaman),fitokimia, dan antioksidan yang diketahui memiliki manfaat kesehatan.
Selain itu, akar burdock dapat memberikan manfaat lain seperti:
Mengurangi Peradangan Kronis Akar burdock mengandung sejumlah antioksidan, seperti quercetin, asam fenolik, dan luteolin, yang dapat membantu melindungi sel Anda dariradikal bebasAntioksidan ini membantu mengurangi peradangan di seluruh tubuh.
Risiko Kesehatan
Akar burdock dianggap aman untuk dimakan atau diminum sebagai teh. Namun, tanaman ini sangat mirip dengan tanaman belladonna nightshade, yang beracun. Disarankan untuk hanya membeli akar burdock dari penjual tepercaya dan menghindari memetiknya sendiri. Selain itu, informasi mengenai efeknya pada anak-anak atau ibu hamil masih sangat terbatas. Konsultasikan dengan dokter Anda sebelum menggunakan akar burdock pada anak-anak atau jika Anda sedang hamil.
Berikut adalah beberapa kemungkinan risiko kesehatan lainnya yang perlu dipertimbangkan jika menggunakan akar burdock:
Peningkatan Dehidrasi
Akar burdock bertindak sebagai diuretik alami, yang dapat menyebabkan dehidrasi. Jika Anda mengonsumsi pil air atau diuretik lainnya, Anda sebaiknya tidak mengonsumsi akar burdock. Jika Anda mengonsumsi obat-obatan ini, penting untuk mewaspadai obat, herbal, dan bahan lain yang dapat menyebabkan dehidrasi.
Reaksi Alergi
Jika Anda sensitif atau memiliki riwayat reaksi alergi terhadap bunga aster, ragweed, atau krisan, Anda berisiko lebih tinggi mengalami reaksi alergi terhadap akar burdock.
-
Harga grosir grosir 100% minyak AsariRadix Et Rhizoma murni, aromaterapi relaksasi Eucalyptus globulus
Studi pada hewan dan in vitro telah menyelidiki potensi efek antijamur, antiinflamasi, dan kardiovaskular dari sassafras dan komponen-komponennya. Namun, uji klinis masih kurang, dan sassafras dianggap tidak aman untuk digunakan. Safrol, komponen utama kulit dan minyak akar sassafras, telah dilarang oleh Badan Pengawas Obat dan Makanan AS (FDA), termasuk untuk digunakan sebagai penyedap atau pewangi, dan tidak boleh digunakan secara internal maupun eksternal, karena berpotensi karsinogenik. Safrol telah digunakan dalam produksi ilegal 3,4-metilen-dioksimetamfetamin (MDMA), yang juga dikenal dengan nama dagang "ekstasi" atau "Molly", dan penjualan safrol serta minyak sassafras dipantau oleh Badan Penegakan Narkoba AS.
-
Harga grosir grosir 100% minyak esensial Stellariae Radix murni (baru) Aromaterapi Santai Eucalyptus globulus
Farmakope Cina (edisi 2020) mensyaratkan bahwa ekstrak metanol YCH tidak boleh kurang dari 20,0% [2], tanpa indikator evaluasi mutu lain yang ditentukan. Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa kandungan ekstrak metanol dari sampel liar dan budidaya memenuhi standar farmakope, dan tidak terdapat perbedaan yang signifikan di antara keduanya. Oleh karena itu, tidak terdapat perbedaan mutu yang nyata antara sampel liar dan budidaya, menurut indeks tersebut. Namun, kandungan total sterol dan total flavonoid dalam sampel liar secara signifikan lebih tinggi daripada sampel budidaya. Analisis metabolomik lebih lanjut menunjukkan keragaman metabolit yang melimpah antara sampel liar dan budidaya. Selain itu, 97 metabolit yang berbeda secara signifikan telah disaring, yang tercantum dalamTabel Tambahan S2Di antara metabolit yang berbeda secara signifikan ini terdapat β-sitosterol (ID-nya M397T42) dan turunan kuersetin (M447T204_2), yang telah dilaporkan sebagai bahan aktif. Konstituen yang sebelumnya tidak dilaporkan, seperti trigonelin (M138T291_2), betain (M118T277_2), fustin (M269T36), rotenon (M241T189), arktiin (M557T165), dan asam loganat (M399T284_2), juga termasuk di antara metabolit diferensial. Komponen-komponen ini memainkan berbagai peran dalam antioksidan, antiinflamasi, penangkal radikal bebas, antikanker, dan pengobatan aterosklerosis, sehingga mungkin merupakan komponen aktif baru dalam YCH. Kandungan bahan aktif menentukan efikasi dan kualitas bahan obat [7]. Singkatnya, ekstrak metanol sebagai satu-satunya indeks evaluasi kualitas YCH memiliki beberapa keterbatasan, dan penanda kualitas yang lebih spesifik perlu dieksplorasi lebih lanjut. Terdapat perbedaan yang signifikan dalam total sterol, total flavonoid, dan kandungan berbagai metabolit diferensial lainnya antara YCH liar dan budidaya; sehingga, terdapat potensi perbedaan kualitas di antara keduanya. Pada saat yang sama, potensi bahan aktif baru yang ditemukan dalam YCH mungkin memiliki nilai referensi penting untuk studi dasar fungsional YCH dan pengembangan lebih lanjut sumber daya YCH.
Pentingnya bahan obat asli telah lama diakui di wilayah asal spesifik untuk menghasilkan obat-obatan herbal Cina dengan kualitas yang sangat baik [8]. Kualitas tinggi merupakan atribut penting dari bahan obat asli, dan habitat merupakan faktor penting yang memengaruhi kualitas bahan tersebut. Sejak YCH mulai digunakan sebagai obat, YCH liar telah lama mendominasi. Setelah keberhasilan introduksi dan domestikasi YCH di Ningxia pada tahun 1980-an, sumber bahan obat Yinchaihu secara bertahap beralih dari YCH liar ke YCH budidaya. Menurut penelitian sebelumnya tentang sumber YCH [9] dan investigasi lapangan kelompok penelitian kami, terdapat perbedaan yang signifikan dalam wilayah distribusi bahan obat yang dibudidayakan dan liar. YCH liar terutama didistribusikan di Daerah Otonomi Ningxia Hui di Provinsi Shaanxi, berdekatan dengan zona kering Mongolia Dalam dan Ningxia tengah. Secara khusus, padang rumput gurun di daerah ini adalah habitat yang paling cocok untuk pertumbuhan YCH. Sebaliknya, YCH yang dibudidayakan terutama didistribusikan ke selatan wilayah distribusi liar, seperti Kabupaten Tongxin (Budidaya I) dan daerah sekitarnya, yang telah menjadi basis budidaya dan produksi terbesar di Tiongkok, dan Kabupaten Pengyang (Budidaya II), yang terletak di daerah yang lebih selatan dan merupakan daerah produksi lain untuk YCH yang dibudidayakan. Selain itu, habitat dari dua wilayah budidaya di atas bukanlah padang rumput gurun. Oleh karena itu, selain cara produksi, ada juga perbedaan yang signifikan dalam habitat YCH liar dan budidaya. Habitat merupakan faktor penting yang memengaruhi kualitas bahan obat herbal. Perbedaan habitat akan mempengaruhi pembentukan dan akumulasi metabolit sekunder pada tanaman, sehingga mempengaruhi kualitas produk obat [10,11]. Oleh karena itu, perbedaan signifikan dalam kandungan flavonoid total dan sterol total serta ekspresi 53 metabolit yang kami temukan dalam penelitian ini mungkin merupakan hasil dari perbedaan pengelolaan lahan dan habitat.Salah satu cara utama lingkungan memengaruhi kualitas bahan obat adalah dengan memberikan tekanan pada tanaman sumber. Tekanan lingkungan yang moderat cenderung merangsang akumulasi metabolit sekunder [12,13Hipotesis keseimbangan pertumbuhan/diferensiasi menyatakan bahwa, ketika nutrisi tersedia dalam jumlah yang cukup, tanaman akan tumbuh secara dominan, sedangkan ketika nutrisi kurang, tanaman akan berdiferensiasi dan menghasilkan lebih banyak metabolit sekunder [14]. Stres kekeringan yang disebabkan oleh kekurangan air merupakan stres lingkungan utama yang dihadapi tanaman di daerah kering. Dalam studi ini, kondisi air pada YCH budidaya lebih melimpah, dengan tingkat curah hujan tahunan yang jauh lebih tinggi daripada YCH liar (suplai air untuk Budidaya I sekitar 2 kali lipat dari Liar; Budidaya II sekitar 3,5 kali lipat dari Liar). Selain itu, tanah di lingkungan liar adalah tanah berpasir, tetapi tanah di lahan pertanian adalah tanah liat. Dibandingkan dengan tanah liat, tanah berpasir memiliki kapasitas retensi air yang buruk dan lebih mungkin memperburuk stres kekeringan. Pada saat yang sama, proses budidaya sering disertai dengan penyiraman, sehingga tingkat stres kekeringan rendah. YCH liar tumbuh di habitat kering alami yang keras, dan oleh karena itu mungkin mengalami stres kekeringan yang lebih serius.Osmoregulasi merupakan mekanisme fisiologis penting yang digunakan tanaman untuk mengatasi stres kekeringan, dan alkaloid merupakan pengatur osmotik penting pada tanaman tingkat tinggi [15Betain adalah senyawa amonium kuartener alkaloid yang larut dalam air dan dapat bertindak sebagai osmoprotektan. Stres kekeringan dapat mengurangi potensi osmotik sel, sementara osmoprotektan mempertahankan dan memelihara struktur serta integritas makromolekul biologis, dan secara efektif mengurangi kerusakan akibat stres kekeringan pada tanaman [16]. Misalnya, pada kondisi stres kekeringan, kandungan betaine pada bit gula dan Lycium barbarum meningkat secara signifikan [17,18Trigonelin merupakan pengatur pertumbuhan sel, dan di bawah tekanan kekeringan, trigonelin dapat memperpanjang siklus sel tanaman, menghambat pertumbuhan sel, dan menyebabkan penyusutan volume sel. Peningkatan relatif konsentrasi zat terlarut dalam sel memungkinkan tanaman mencapai regulasi osmotik dan meningkatkan kemampuannya untuk menahan tekanan kekeringan.19]. JIA X [20] menemukan bahwa, dengan peningkatan stres kekeringan, Astragalus membranaceus (sumber pengobatan tradisional Tiongkok) menghasilkan lebih banyak trigonelin, yang berperan mengatur potensial osmotik dan meningkatkan kemampuan tanaman untuk melawan stres kekeringan. Flavonoid juga telah terbukti berperan penting dalam ketahanan tanaman terhadap stres kekeringan [21,22]. Sejumlah besar penelitian telah mengonfirmasi bahwa stres kekeringan sedang berkontribusi terhadap akumulasi flavonoid. Lang Duo-Yong dkk. [23] membandingkan efek stres kekeringan terhadap YCH dengan mengendalikan kapasitas menahan air di lapangan. Ditemukan bahwa stres kekeringan menghambat pertumbuhan akar sampai batas tertentu, tetapi pada stres kekeringan sedang dan berat (kapasitas menahan air lapangan 40%), total kandungan flavonoid dalam YCH meningkat. Sementara itu, pada kondisi stres kekeringan, fitosterol dapat berperan mengatur fluiditas dan permeabilitas membran sel, menghambat kehilangan air, dan meningkatkan ketahanan terhadap stres [24,25]. Oleh karena itu, peningkatan akumulasi flavonoid total, sterol total, betain, trigonelin, dan metabolit sekunder lainnya pada YCH liar mungkin terkait dengan stres kekeringan intensitas tinggi.Dalam penelitian ini, analisis pengayaan jalur KEGG dilakukan terhadap metabolit yang ditemukan berbeda secara signifikan antara YCH liar dan budidaya. Metabolit yang diperkaya mencakup metabolit yang terlibat dalam jalur metabolisme askorbat dan aldarat, biosintesis aminoasil-tRNA, metabolisme histidin, dan metabolisme beta-alanin. Jalur metabolisme ini berkaitan erat dengan mekanisme ketahanan tanaman terhadap stres. Di antaranya, metabolisme askorbat berperan penting dalam produksi antioksidan tanaman, metabolisme karbon dan nitrogen, ketahanan terhadap stres, dan fungsi fisiologis lainnya [26]; biosintesis aminoasil-tRNA merupakan jalur penting untuk pembentukan protein [27,28], yang terlibat dalam sintesis protein tahan stres. Jalur histidin dan β-alanin dapat meningkatkan toleransi tanaman terhadap stres lingkungan [29,30]. Hal ini selanjutnya menunjukkan bahwa perbedaan metabolit antara YCH liar dan budidaya berkaitan erat dengan proses ketahanan terhadap stres.Tanah merupakan basis material bagi pertumbuhan dan perkembangan tanaman obat. Nitrogen (N), fosfor (P), dan kalium (K) dalam tanah merupakan unsur hara penting bagi pertumbuhan dan perkembangan tanaman. Bahan organik tanah juga mengandung N, P, K, Zn, Ca, Mg, dan unsur makro serta mikro lainnya yang dibutuhkan tanaman obat. Nutrisi yang berlebih atau kurang, atau rasio nutrisi yang tidak seimbang, akan memengaruhi pertumbuhan dan perkembangan serta kualitas bahan obat, dan setiap tanaman memiliki kebutuhan nutrisi yang berbeda.31,32,33]. Sebagai contoh, stres N rendah mendorong sintesis alkaloid pada Isatis indigotica, dan bermanfaat bagi akumulasi flavonoid pada tanaman seperti Tetrastigma hemsleyanum, Crataegus pinnatifida Bunge, dan Dichondra repens Forst. Sebaliknya, stres N yang berlebihan menghambat akumulasi flavonoid pada spesies seperti Erigeron breviscapus, Abrus cantoniensis, dan Ginkgo biloba, serta memengaruhi kualitas bahan obat [34]. Pemberian pupuk P efektif dalam meningkatkan kandungan asam glisirizat dan dihidroaseton pada tanaman akar manis Ural [35]. Ketika jumlah aplikasi melebihi 0,12 kg·m−2, total kandungan flavonoid dalam Tussilago farfara menurun [36]. Aplikasi pupuk P memiliki efek negatif terhadap kandungan polisakarida dalam rhizoma polygonati obat tradisional Cina [37], namun pupuk K efektif meningkatkan kandungan saponinnya [38]. Pemberian pupuk K dengan dosis 450 kg·hm−2 merupakan pupuk terbaik terhadap pertumbuhan dan akumulasi saponin tanaman Panax notoginseng umur dua tahun [39]. Dengan rasio N:P:K = 2:2:1, jumlah total ekstrak hidrotermal, harpagida dan harpagosida adalah yang tertinggi [40Rasio N, P, dan K yang tinggi bermanfaat untuk mendorong pertumbuhan Pogostemon cablin dan meningkatkan kandungan minyak atsiri. Rasio N, P, dan K yang rendah meningkatkan kandungan komponen efektif utama minyak daun batang Pogostemon cablin [41]. YCH merupakan tanaman yang toleran terhadap tanah tandus, dan mungkin memiliki kebutuhan spesifik akan unsur hara seperti N, P, dan K. Dalam penelitian ini, dibandingkan dengan YCH budidaya, tanah tanaman YCH liar relatif tandus: kandungan bahan organik, N total, P total, dan K total dalam tanah masing-masing sekitar 1/10, 1/2, 1/3, dan 1/3 dari kandungan bahan organik, N total, P total, dan K total pada tanaman budidaya. Oleh karena itu, perbedaan unsur hara tanah mungkin menjadi alasan lain perbedaan antara metabolit yang terdeteksi pada YCH budidaya dan liar. Weibao Ma dkk.42] menemukan bahwa pemberian pupuk N dan P dalam jumlah tertentu secara signifikan meningkatkan hasil dan kualitas benih. Namun, pengaruh unsur hara terhadap kualitas YCH belum jelas, dan langkah-langkah pemupukan untuk meningkatkan kualitas bahan obat perlu dikaji lebih lanjut.Obat herbal Cina mempunyai karakteristik “Habitat yang baik akan meningkatkan hasil panen, sedangkan habitat yang tidak baik akan meningkatkan kualitas” [43Dalam proses peralihan bertahap dari YCH liar ke budidaya, habitat tanaman berubah dari padang rumput gurun yang gersang dan tandus menjadi lahan pertanian yang subur dengan air yang lebih melimpah. Habitat YCH budidaya lebih unggul dan hasilnya lebih tinggi, yang membantu memenuhi permintaan pasar. Namun, habitat unggul ini menyebabkan perubahan signifikan pada metabolit YCH; apakah hal ini kondusif untuk meningkatkan kualitas YCH dan bagaimana mencapai produksi YCH berkualitas tinggi melalui langkah-langkah budidaya berbasis sains masih memerlukan penelitian lebih lanjut.Budidaya habitat simulasi adalah suatu metode simulasi habitat dan kondisi lingkungan tanaman obat liar, berdasarkan pengetahuan tentang adaptasi jangka panjang tanaman terhadap tekanan lingkungan tertentu [43]. Dengan mensimulasikan berbagai faktor lingkungan yang memengaruhi tanaman liar, terutama habitat asli tanaman yang digunakan sebagai sumber bahan obat asli, pendekatan ini menggunakan desain ilmiah dan intervensi manusia yang inovatif untuk menyeimbangkan pertumbuhan dan metabolisme sekunder tanaman obat Tiongkok [43]. Metode ini bertujuan untuk mencapai pengaturan optimal bagi pengembangan bahan obat berkualitas tinggi. Budidaya habitat simulasi dapat menjadi cara yang efektif untuk produksi YCH berkualitas tinggi, bahkan ketika dasar farmakodinamik, penanda kualitas, dan mekanisme respons terhadap faktor lingkungan belum jelas. Oleh karena itu, kami menyarankan agar perancangan ilmiah dan langkah-langkah pengelolaan lapangan dalam budidaya dan produksi YCH dilakukan dengan mengacu pada karakteristik lingkungan YCH liar, seperti kondisi tanah kering, tandus, dan berpasir. Pada saat yang sama, para peneliti juga diharapkan melakukan penelitian yang lebih mendalam tentang dasar material fungsional dan penanda kualitas YCH. Studi-studi ini dapat memberikan kriteria evaluasi yang lebih efektif untuk YCH, serta mendorong produksi berkualitas tinggi dan pembangunan industri yang berkelanjutan. -
Minyak Herbal Fructus Amomi Diffuser Pijat Alami 1kg Minyak Esensial Amomum villosum
Famili Zingiberaceae semakin menarik perhatian dalam penelitian alelopati karena kandungan minyak atsiri yang kaya dan aromatisitas spesies anggotanya. Penelitian sebelumnya menunjukkan bahwa zat kimia dari Curcuma zedoaria (Zedoary) [40], Alpinia zerumbet (Pers.) BLBurtt & RMSm. [41] dan Zingiber officinale Rosc. [42] dari famili jahe memiliki efek alelopati terhadap perkecambahan biji dan pertumbuhan bibit jagung, selada, dan tomat. Studi kami saat ini merupakan laporan pertama tentang aktivitas alelopati volatil dari batang, daun, dan buah muda A. villosum (anggota famili Zingiberaceae). Rendemen minyak dari batang, daun, dan buah muda masing-masing adalah 0,15%, 0,40%, dan 0,50%, yang menunjukkan bahwa buah menghasilkan minyak atsiri dalam jumlah lebih besar daripada batang dan daun. Komponen utama minyak atsiri dari batang adalah β-pinena, β-fellandren, dan α-pinena, yang polanya serupa dengan bahan kimia utama minyak daun, β-pinena dan α-pinena (hidrokarbon monoterpena). Di sisi lain, minyak dalam buah muda kaya akan bornil asetat dan kamper (monoterpena teroksigenasi). Hasil ini didukung oleh temuan Do N Dai [30,32] dan Hui Ao [31] yang telah mengidentifikasi minyak dari berbagai organ A. villosum.
Telah ada beberapa laporan mengenai aktivitas penghambatan pertumbuhan tanaman dari senyawa-senyawa utama ini pada spesies lain. Shalinder Kaur menemukan bahwa α-pinena dari eukaliptus secara signifikan menghambat panjang akar dan tinggi pucuk Amaranthus viridis L. pada konsentrasi 1,0 μL [43], dan penelitian lain menunjukkan bahwa α-pinene menghambat pertumbuhan akar awal dan menyebabkan kerusakan oksidatif pada jaringan akar melalui peningkatan pembentukan spesies oksigen reaktif [44]. Beberapa laporan menyatakan bahwa β-pinene menghambat perkecambahan dan pertumbuhan bibit gulma uji dalam cara respons yang bergantung dosis dengan mengganggu integritas membran [45], mengubah biokimia tanaman dan meningkatkan aktivitas peroksidase dan polifenol oksidase [46]. β-Phellandrene menunjukkan penghambatan maksimum terhadap perkecambahan dan pertumbuhan Vigna unguiculata (L.) Walp pada konsentrasi 600 ppm [47], sedangkan pada konsentrasi 250 mg/m3, kamper menghambat pertumbuhan radikula dan tunas Lepidium sativum L. [48]. Namun, penelitian yang melaporkan efek alelopati bornil asetat masih sedikit. Dalam penelitian kami, efek alelopati β-pinena, bornil asetat, dan kamper terhadap panjang akar lebih lemah dibandingkan minyak atsiri kecuali α-pinena, sedangkan minyak daun, yang kaya akan α-pinena, juga lebih fitotoksik dibandingkan minyak atsiri yang berasal dari batang dan buah A. villosum. Kedua temuan ini menunjukkan bahwa α-pinena mungkin merupakan zat kimia penting untuk alelopati oleh spesies ini. Pada saat yang sama, hasil penelitian ini juga menyiratkan bahwa beberapa senyawa dalam minyak buah yang jumlahnya tidak melimpah mungkin berkontribusi terhadap produksi efek fitotoksik, sebuah temuan yang memerlukan penelitian lebih lanjut di masa mendatang.Dalam kondisi normal, efek alelopati alelokimia bersifat spesifik terhadap spesies. Jiang dkk. menemukan bahwa minyak atsiri yang dihasilkan oleh Artemisia sieversiana memberikan efek yang lebih kuat pada Amaranthus retroflexus L. dibandingkan pada Medicago sativa L., Poa annua L., dan Pennisetum alopecuroides (L.) Spreng.49]. Dalam penelitian lain, minyak atsiri Lavandula angustifolia Mill. menghasilkan berbagai tingkat efek fitotoksik pada berbagai spesies tanaman. Lolium multiflorum Lam. merupakan spesies akseptor yang paling sensitif, dengan pertumbuhan hipokotil dan radikula yang terhambat masing-masing sebesar 87,8% dan 76,7% pada dosis minyak 1 μL/mL, tetapi pertumbuhan hipokotil pada bibit mentimun hampir tidak terpengaruh [20]. Hasil kami juga menunjukkan adanya perbedaan sensitivitas terhadap zat volatil A. villosum antara L. sativa dan L. perenne.Senyawa volatil dan minyak atsiri dari spesies yang sama dapat bervariasi secara kuantitatif dan/atau kualitatif karena kondisi pertumbuhan, bagian tanaman, dan metode deteksi. Sebagai contoh, sebuah laporan menunjukkan bahwa piranoid (10,3%) dan β-kariofilen (6,6%) merupakan senyawa volatil utama yang dipancarkan dari daun Sambucus nigra, sedangkan benzaldehida (17,8%), α-bulnesena (16,6%), dan tetrakosana (11,5%) melimpah dalam minyak yang diekstraksi dari daun [50]. Dalam penelitian kami, senyawa volatil yang dilepaskan oleh bahan tanaman segar memiliki efek alelopati yang lebih kuat pada tanaman uji dibandingkan minyak volatil yang diekstraksi, dan perbedaan respons ini berkaitan erat dengan perbedaan alelokimia yang terdapat dalam kedua sediaan. Perbedaan pasti antara senyawa volatil dan minyak perlu diteliti lebih lanjut dalam percobaan selanjutnya.Perbedaan keanekaragaman mikroba dan struktur komunitas mikroba dalam sampel tanah yang telah ditambahkan minyak atsiri berkaitan dengan kompetisi antar mikroorganisme, efek toksik, dan lamanya minyak atsiri berada di dalam tanah. Vokou dan Liotiri [51] menemukan bahwa aplikasi masing-masing empat minyak esensial (0,1 mL) pada tanah yang diolah (150 g) mengaktifkan respirasi sampel tanah, meskipun komposisi kimia minyaknya berbeda, menunjukkan bahwa minyak tumbuhan digunakan sebagai sumber karbon dan energi oleh mikroorganisme tanah yang ada. Data yang diperoleh dari penelitian ini menegaskan bahwa minyak dari seluruh tumbuhan A. villosum berkontribusi terhadap peningkatan jumlah spesies jamur tanah yang nyata pada hari ke-14 setelah penambahan minyak, yang menunjukkan bahwa minyak tersebut dapat menyediakan sumber karbon bagi lebih banyak jamur tanah. Penelitian lain melaporkan temuan: mikroorganisme tanah memulihkan fungsi dan biomassa awal mereka setelah periode variasi sementara yang disebabkan oleh penambahan minyak Thymbra capitata L. (Cav), tetapi minyak pada dosis tertinggi (0,93 µL minyak per gram tanah) tidak memungkinkan mikroorganisme tanah memulihkan fungsi awal [52]. Dalam studi terkini, berdasarkan analisis mikrobiologi tanah setelah diberi perlakuan dengan hari dan konsentrasi yang berbeda, kami berspekulasi bahwa komunitas bakteri tanah akan pulih setelah beberapa hari. Sebaliknya, mikrobiota jamur tidak dapat kembali ke keadaan semula. Hasil berikut mengonfirmasi hipotesis ini: efek nyata dari konsentrasi tinggi minyak terhadap komposisi mikrobioma jamur tanah terungkap melalui analisis koordinat utama (PCoA), dan presentasi peta panas mengonfirmasi kembali bahwa komposisi komunitas jamur tanah yang diberi perlakuan minyak 3,0 mg/mL (yaitu 0,375 mg minyak per gram tanah) pada tingkat genus berbeda secara signifikan dari perlakuan lainnya. Saat ini, penelitian tentang efek penambahan hidrokarbon monoterpena atau monoterpena teroksigenasi terhadap keragaman mikroba tanah dan struktur komunitas masih terbatas. Beberapa penelitian melaporkan bahwa α-pinene meningkatkan aktivitas mikroba tanah dan kelimpahan relatif Methylophilaceae (sekelompok metilotrof, Proteobacteria) pada kadar air rendah, memainkan peran penting sebagai sumber karbon di tanah yang lebih kering [53]. Demikian pula, minyak atsiri seluruh tanaman A. villosum, mengandung 15,03% α-pinene (Tabel Tambahan S1), jelas meningkatkan kelimpahan relatif Proteobacteria pada 1,5 mg/mL dan 3,0 mg/mL, yang menunjukkan bahwa α-pinene mungkin bertindak sebagai salah satu sumber karbon bagi mikroorganisme tanah.Senyawa volatil yang dihasilkan oleh berbagai organ A. villosum memiliki berbagai tingkat efek alelopati pada L. sativa dan L. perenne, yang berkaitan erat dengan kandungan kimia yang terkandung dalam bagian tanaman A. villosum. Meskipun komposisi kimia minyak atsiri telah dikonfirmasi, senyawa volatil yang dilepaskan oleh A. villosum pada suhu ruangan belum diketahui, sehingga perlu diteliti lebih lanjut. Selain itu, efek sinergis antar berbagai alelokimia juga patut dipertimbangkan. Dalam hal mikroorganisme tanah, untuk mengeksplorasi efek minyak atsiri terhadap mikroorganisme tanah secara komprehensif, kita masih perlu melakukan penelitian yang lebih mendalam: memperpanjang waktu perlakuan minyak atsiri dan mengamati variasi komposisi kimia minyak atsiri dalam tanah pada hari yang berbeda. -
Minyak Artemisia capillaris murni untuk pembuatan lilin dan sabun grosir diffuser minyak esensial baru untuk diffuser pembakar buluh
Desain model hewan pengerat
Hewan-hewan tersebut dibagi secara acak menjadi lima kelompok yang masing-masing terdiri dari lima belas ekor tikus. Kelompok kontrol dan kelompok model tikus diberi gavageminyak wijenselama 6 hari. Tikus kelompok kontrol positif diberi tablet bifendat (BT, 10 mg/kg) secara gavage selama 6 hari. Kelompok eksperimen diberi AEO 100 mg/kg dan 50 mg/kg yang dilarutkan dalam minyak wijen selama 6 hari. Pada hari ke-6, kelompok kontrol diberi minyak wijen, dan semua kelompok lainnya diberi dosis tunggal 0,2% CCl4 dalam minyak wijen (10 ml/kg) dengansuntikan intraperitonealTikus kemudian dipuasakan dan tidak diberi air, dan sampel darah diambil dari pembuluh retrobulbar; darah yang terkumpul disentrifugasi pada 3000 ×gselama 10 menit untuk memisahkan serum.Dislokasi serviksdilakukan segera setelah pengambilan darah, dan sampel hati segera diambil. Satu bagian sampel hati segera disimpan pada suhu -20 °C hingga dianalisis, dan bagian lainnya dieksisi dan difiksasi dalam larutan 10%.formalinlarutan; jaringan yang tersisa disimpan pada suhu −80 °C untuk analisis histopatologi (Wang dkk., 2008,Hsu dkk., 2009,Nie dkk., 2015).
Pengukuran parameter biokimia dalam serum
Cedera hati dinilai dengan memperkirakanaktivitas enzimatikALT dan AST serum menggunakan kit komersial yang sesuai sesuai petunjuk kit (Nanjing, Provinsi Jiangsu, Tiongkok). Aktivitas enzimatik dinyatakan dalam satuan per liter (U/l).
Pengukuran MDA, SOD, GSH dan GSH-Pxdalam homogenat hati
Jaringan hati dihomogenkan dengan larutan garam fisiologis dingin dengan rasio 1:9 (b/v, hati:garam). Homogenat kemudian disentrifugasi (2500 × 1000).g(selama 10 menit) untuk mengumpulkan supernatan untuk penentuan selanjutnya. Kerusakan hati dinilai berdasarkan pengukuran kadar MDA dan GSH di hati serta kadar SOD dan GSH-P.xSemua aktivitas ini ditentukan sesuai petunjuk pada kit (Nanjing, Provinsi Jiangsu, Tiongkok). Hasil untuk MDA dan GSH dinyatakan dalam nmol per mg protein (nmol/mg protein), dan aktivitas SOD dan GSH-Pxdiekspresikan sebagai U per mg protein (U/mg prot).
Analisis histopatologi
Bagian hati yang baru diperoleh difiksasi dalam buffer 10%paraformaldehidalarutan fosfat. Sampel kemudian ditanamkan dalam parafin, diiris menjadi bagian 3–5 μm, diwarnai denganhematoksilinDaneosin(H&E) sesuai dengan prosedur standar, dan akhirnya dianalisis olehmikroskop cahaya(Tian dkk., 2012).
Analisis statistik
Hasilnya dinyatakan sebagai rata-rata ± simpangan baku (SD). Hasilnya dianalisis menggunakan program statistik SPSS Statistics versi 19.0. Data tersebut kemudian dianalisis variansnya (ANOVA,p< 0,05) diikuti oleh uji Dunnett dan uji T3 Dunnett untuk menentukan perbedaan yang signifikan secara statistik antara nilai-nilai berbagai kelompok eksperimen. Perbedaan yang signifikan dianggap pada tingkatp< 0,05.
Hasil dan Pembahasan
Konstituen AEO
Berdasarkan analisis GC/MS, AEO ditemukan mengandung 25 konstituen yang dielusi dari 10 hingga 35 menit, dan 21 konstituen yang mewakili 84% minyak atsiri teridentifikasi (Tabel 1). Minyak atsiri yang terkandungmonoterpenoid(80,9%), seskuiterpenoid (9,5%), hidrokarbon jenuh tak bercabang (4,86%) dan asetilena lain-lain (4,86%). Dibandingkan dengan penelitian lain (Guo dkk., 2004), kami menemukan monoterpenoid yang melimpah (80,90%) dalam AEO. Hasil penelitian menunjukkan bahwa komponen AEO yang paling melimpah adalah β-sitronelol (16,23%). Komponen utama AEO lainnya meliputi 1,8-sineol (13,9%),kamper(12,59%),linalool(11,33%), α-pinena (7,21%), β-pinena (3,99%),timol(3,22%), danmirsen(2,02%). Variasi komposisi kimia mungkin terkait dengan kondisi lingkungan tempat tanaman terpapar, seperti air mineral, sinar matahari, tahap perkembangan dannutrisi.
-
Minyak Saposhnikovia divaricata murni untuk pembuatan lilin dan sabun grosir diffuser minyak esensial baru untuk diffuser pembakar buluh
2.1. Penyusunan SDE
Rimpang SD dibeli sebagai herba kering dari Hanherb Co. (Guri, Korea). Bahan tanaman dikonfirmasi secara taksonomi oleh Dr. Go-Ya Choi dari Institut Pengobatan Oriental Korea (KIOM). Spesimen voucher (nomor 2014 SDE-6) disimpan di Herbarium Korea Standard Herbal Resources. Rimpang kering SD (320 g) diekstraksi dua kali dengan etanol 70% (dengan refluks 2 jam) dan ekstrak kemudian dipekatkan pada tekanan rendah. Dekok disaring, dikeringkan, dan disimpan pada suhu 4°C. Rendemen ekstrak kering dari bahan awal mentah adalah 48,13% (b/b).
2.2. Analisis Kuantitatif Kromatografi Cair Kinerja Tinggi (HPLC)
Analisis kromatografi dilakukan dengan sistem HPLC (Waters Co., Milford, MA, AS) dan detektor susunan fotodioda. Untuk analisis SDE dengan HPLC,O-standar glukosilcimifugin dibeli dari Institut Promosi Korea untuk Industri Obat Tradisional (Gyeongsan, Korea), dandetik-O-glukosilhamaudol dan 4′-O-β-D-glukosil-5-O-methylvisamminol diisolasi di laboratorium kami dan diidentifikasi melalui analisis spektral, terutama dengan NMR dan MS.
Sampel SDE (0,1 mg) dilarutkan dalam etanol 70% (10 mL). Pemisahan kromatografi dilakukan dengan kolom XSelect HSS T3 C18 (4,6 × 250 mm, 5μm, Waters Co., Milford, MA, AS). Fase gerak terdiri dari asetonitril (A) dan asam asetat 0,1% dalam air (B) dengan laju alir 1,0 mL/menit. Program gradien multitahap digunakan sebagai berikut: 5% A (0 menit), 5–20% A (0–10 menit), 20% A (10–23 menit), dan 20–65% A (23–40 menit). Panjang gelombang deteksi dipindai pada 210–400 nm dan direkam pada 254 nm. Volume injeksi adalah 10,0μL. Larutan standar untuk penentuan tiga kromon disiapkan pada konsentrasi akhir 7,781 mg/mL (prim-O-glukosilsimifugin), 31,125 mg/mL (4′-O-β-D-glukosil-5-O-metilvisamminol), dan 31,125 mg/mL (detik-O-glucosylhamaudol) dalam metanol dan disimpan pada suhu 4°C.
2.3. Evaluasi Aktivitas AntiinflamasiIn Vitro
2.3.1. Kultur Sel dan Perlakuan Sampel
Sel RAW 264.7 diperoleh dari American Type Culture Collection (ATCC, Manassas, VA, AS) dan ditumbuhkan dalam medium DMEM yang mengandung 1% antibiotik dan 5,5% FBS. Sel diinkubasi dalam atmosfer lembap dengan konsentrasi 5% CO2 pada suhu 37°C. Untuk menstimulasi sel, medium diganti dengan medium DMEM baru dan lipopolisakarida (LPS, Sigma-Aldrich Chemical Co., St. Louis, MO, AS) pada suhu 1°C.μg/mL ditambahkan dengan atau tanpa adanya SDE (200 atau 400μg/mL) selama 24 jam tambahan.
2.3.2. Penentuan Nitric Oxide (NO), Prostaglandin E2 (PGE2), Tumor Necrosis Factor-α(TNF-α), dan Produksi Interleukin-6 (IL-6)
Sel diperlakukan dengan SDE dan distimulasi dengan LPS selama 24 jam. Produksi NO dianalisis dengan mengukur nitrit menggunakan reagen Griess menurut penelitian sebelumnya [12]. Sekresi sitokin inflamasi PGE2, TNF-α, dan IL-6 ditentukan menggunakan kit ELISA (sistem R&D) sesuai petunjuk produsen. Efek SDE terhadap produksi NO dan sitokin ditentukan pada 540 nm atau 450 nm menggunakan Wallac EnVision.™pembaca mikroplat (PerkinElmer).
2.4. Evaluasi Aktivitas AntiosteoartritisDalam Hidup
2.4.1. Hewan
Tikus Sprague-Dawley jantan (umur 7 minggu) dibeli dari Samtako Inc. (Osan, Korea) dan ditempatkan dalam kondisi terkendali dengan siklus terang/gelap 12 jam di°C dan% kelembaban. Tikus diberi diet laboratorium dan airsepuasnyaSemua prosedur eksperimen dilakukan sesuai dengan pedoman National Institutes of Health (NIH) dan disetujui oleh Komite Perawatan dan Penggunaan Hewan Universitas Daejeon (Daejeon, Republik Korea).
2.4.2. Induksi OA dengan MIA pada Tikus
Hewan-hewan tersebut diacak dan ditugaskan ke kelompok perlakuan sebelum dimulainya penelitian (per kelompok). Larutan MIA (3 mg/50μL larutan garam 0,9%) disuntikkan langsung ke dalam ruang intra-artikular lutut kanan di bawah anestesi yang diinduksi dengan campuran ketamin dan xylazine. Tikus dibagi secara acak menjadi empat kelompok: (1) kelompok garam tanpa injeksi MIA, (2) kelompok MIA dengan injeksi MIA, (3) kelompok yang diobati dengan SDE (200 mg/kg) dengan injeksi MIA, dan (4) kelompok yang diobati dengan indometasin (IM-) (2 mg/kg) dengan injeksi MIA. Tikus diberikan SDE dan IM secara oral 1 minggu sebelum injeksi MIA selama 4 minggu. Dosis SDE dan IM yang digunakan dalam penelitian ini didasarkan pada dosis yang digunakan dalam penelitian sebelumnya [10,13,14].
2.4.3. Pengukuran Distribusi Berat Badan Kaki Belakang
Setelah induksi OA, keseimbangan awal kemampuan menahan beban kaki belakang terganggu. Alat uji ketidakmampuan (Linton Instrumentation, Norfolk, Inggris) digunakan untuk mengevaluasi perubahan toleransi menahan beban. Tikus ditempatkan dengan hati-hati ke dalam ruang pengukuran. Gaya menahan beban yang diberikan oleh kaki belakang dirata-ratakan selama 3 detik. Rasio distribusi berat dihitung dengan persamaan berikut: [berat pada kaki belakang kanan/(berat pada kaki belakang kanan + berat pada kaki belakang kiri)] × 100 [15].
2.4.4. Pengukuran Kadar Sitokinin Serum
Sampel darah disentrifugasi pada kecepatan 1.500 g selama 10 menit pada suhu 4°C; kemudian serum dikumpulkan dan disimpan pada suhu -70°C hingga digunakan. Kadar IL-1β, IL-6, TNF-α, dan PGE2 dalam serum diukur menggunakan kit ELISA dari R&D Systems (Minneapolis, MN, AS) sesuai dengan petunjuk pabrik.
2.4.5. Analisis RT-PCR Kuantitatif Real-Time
Total RNA diekstraksi dari jaringan sendi lutut menggunakan reagen TRI® (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, AS), ditranskripsi balik menjadi cDNA, dan diamplifikasi dengan PCR menggunakan kit PCR TM One Step RT dengan SYBR green (Applied Biosystems, Grand Island, NY, AS). PCR kuantitatif waktu nyata dilakukan menggunakan sistem PCR Waktu Nyata Applied Biosystems 7500 (Applied Biosystems, Grand Island, NY, AS). Urutan primer dan urutan probe ditunjukkan pada Tabel.1Alikuot cDNA sampel dan cDNA GAPDH dalam jumlah yang sama diamplifikasi dengan campuran induk PCR TaqMan® Universal yang mengandung DNA polimerase sesuai dengan petunjuk produsen (Applied Biosystems, Foster, CA, AS). Kondisi PCR adalah 2 menit pada suhu 50°C, 10 menit pada suhu 94°C, 15 detik pada suhu 95°C, dan 1 menit pada suhu 60°C selama 40 siklus. Konsentrasi gen target ditentukan menggunakan metode Ct komparatif (nomor siklus ambang batas pada titik persilangan antara plot amplifikasi dan ambang batas), sesuai dengan petunjuk produsen.
