Minyak Saposhnikovia divaricata murni untuk pembuatan lilin dan sabun grosir minyak esensial diffuser baru untuk diffuser pembakar buluh

deskripsi singkat:

2.1. Persiapan SDE

Rimpang SD dibeli sebagai ramuan kering dari Hanherb Co. (Guri, Korea). Bahan tanaman dikonfirmasi secara taksonomi oleh Dr. Go-Ya Choi dari Korea Institute of Oriental Medicine (KIOM). Spesimen voucher (nomor 2014 SDE-6) disimpan di Herbarium Sumber Daya Herbal Standar Korea. Rimpang SD kering (320 g) diekstraksi dua kali dengan etanol 70% (dengan refluks 2 jam) dan ekstrak kemudian dipekatkan pada tekanan rendah. Rebusan disaring, diliofilisasi, dan disimpan pada suhu 4°C. Rendemen ekstrak kering bahan awal mentah sebesar 48,13% (b/b).

2.2. Analisis Kuantitatif Kromatografi Cair Kinerja Tinggi (HPLC).

Analisis kromatografi dilakukan dengan sistem HPLC (Waters Co., Milford, MA, USA) dan detektor susunan fotodioda. Untuk analisis HPLC SDE, yang utama adalahO-standar glukosilcimifugin dibeli dari Institut Promosi Korea untuk Industri Obat Tradisional (Gyeongsan, Korea), dandetik-O-glukosilhamaudol dan 4′-O-β-D-glukosil-5-O-methylvisamminol diisolasi di laboratorium kami dan diidentifikasi dengan analisis spektral, terutama oleh NMR dan MS.

Sampel SDE (0,1 mg) dilarutkan dalam etanol 70% (10 mL). Pemisahan kromatografi dilakukan dengan kolom XSelect HSS T3 C18 (4,6 × 250 mm, 5μm, Waters Co., Milford, MA, AS). Fase gerak terdiri dari asetonitril (A) dan asam asetat 0,1% dalam air (B) dengan laju alir 1,0 mL/menit. Program gradien multilangkah digunakan sebagai berikut: 5% A (0 menit), 5–20% A (0–10 menit), 20% A (10–23 menit), dan 20–65% A (23–40 menit ). Panjang gelombang deteksi dipindai pada 210-400 nm dan dicatat pada 254 nm. Volume injeksi adalah 10,0μL. Larutan standar untuk penentuan tiga kromon disiapkan pada konsentrasi akhir 7,781 mg/mL (prim-O-glukosilcimifugin), 31,125 mg/mL (4′-O-β-D-glukosil-5-O-metilvisamminol), dan 31,125 mg/mL (detik-O-glukosilhamaudol) dalam metanol dan disimpan pada suhu 4°C.

2.3. Evaluasi Aktivitas Anti-PeradanganSecara in vitro

2.3.1. Kultur Sel dan Perawatan Sampel

Sel RAW 264,7 diperoleh dari American Type Culture Collection (ATCC, Manassas, VA, USA) dan ditanam dalam media DMEM yang mengandung 1% antibiotik dan 5,5% FBS. Sel diinkubasi dalam atmosfer lembab 5% CO2 pada suhu 37°C. Untuk merangsang sel, media diganti dengan media DMEM segar, dan lipopolisakarida (LPS, Sigma-Aldrich Chemical Co., St. Louis, MO, USA) pada 1μg/mL ditambahkan dengan ada atau tidaknya SDE (200 atau 400μg/mL) selama 24 jam tambahan.

2.3.2. Penentuan Nitric Oxide (NO), Prostaglandin E2 (PGE2), Tumor Necrosis Factor-α(TNF-α), dan Produksi Interleukin-6 (IL-6).

Sel diobati dengan SDE dan distimulasi dengan LPS selama 24 jam. Produksi NO dianalisis dengan mengukur nitrit menggunakan reagen Griess menurut penelitian sebelumnya [12]. Sekresi sitokin inflamasi PGE2, TNF-α, dan IL-6 ditentukan menggunakan kit ELISA (sistem R&D) sesuai dengan instruksi pabrik. Efek SDE pada produksi NO dan sitokin ditentukan pada 540 nm atau 450 nm menggunakan Wallac EnVision™pembaca pelat mikro (PerkinElmer).

2.4. Evaluasi Aktivitas AntiosteoarthritisDi Vivo

2.4.1. Hewan

Tikus Sprague-Dawley jantan (berusia 7 minggu) dibeli dari Samtako Inc. (Osan, Korea) dan ditempatkan dalam kondisi terkendali dengan siklus terang/gelap 12 jam di°C dan% kelembaban. Tikus diberi makanan laboratorium dan airsecara ad libitum. Semua prosedur eksperimental dilakukan sesuai dengan pedoman National Institutes of Health (NIH) dan disetujui oleh Komite Perawatan dan Penggunaan Hewan dari universitas Daejeon (Daejeon, republik Korea).

2.4.2. Induksi OA dengan MIA pada Tikus

Hewan-hewan diacak dan dimasukkan ke dalam kelompok perlakuan sebelum memulai penelitian (per kelompok). Larutan MIA (3 mg/50μL saline 0,9%) disuntikkan langsung ke ruang intra-artikular lutut kanan dengan anestesi yang diinduksi dengan campuran ketamin dan xylazine. Tikus dibagi secara acak menjadi empat kelompok: (1) kelompok saline tanpa suntikan MIA, (2) kelompok MIA dengan suntikan MIA, (3) kelompok yang diberi perlakuan SDE (200 mg/kg) dengan suntikan MIA, dan (4 ) kelompok perlakuan indometasin (IM-) (2 mg/kg) dengan injeksi MIA. Tikus diberikan secara oral dengan SDE dan IM 1 minggu sebelum injeksi MIA selama 4 minggu. Dosis SDE dan IM yang digunakan dalam penelitian ini didasarkan pada penelitian sebelumnya [10,13,14].

2.4.3. Pengukuran Distribusi Penahan Beban Hindpaw

Setelah induksi OA, keseimbangan kemampuan menahan beban pada kaki belakang terganggu. Penguji ketidakmampuan (Instrumentasi Linton, Norfolk, UK) digunakan untuk mengevaluasi perubahan toleransi menahan beban. Tikus ditempatkan dengan hati-hati ke dalam ruang pengukuran. Kekuatan menahan beban yang diberikan oleh tungkai belakang dirata-ratakan selama periode 3 detik. Rasio distribusi berat dihitung dengan persamaan berikut: [berat pada tungkai belakang kanan/(berat pada tungkai belakang kanan + berat pada tungkai belakang kiri)] × 100 [15].

2.4.4. Pengukuran Kadar Sitokin Serum

Sampel darah disentrifugasi pada 1.500 g selama 10 menit pada suhu 4°C; kemudian serum dikumpulkan dan disimpan pada suhu −70°C sampai digunakan. Tingkat IL-1β, IL-6, TNF-α, dan PGE2 dalam serum diukur menggunakan kit ELISA dari R&D Systems (Minneapolis, MN, USA) sesuai dengan instruksi pabrik.

2.4.5. Analisis RT-PCR Kuantitatif Waktu Nyata

Total RNA diekstraksi dari jaringan sendi lutut menggunakan reagen TRI® (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA), ditranskripsi terbalik menjadi cDNA dan diamplifikasi dengan PCR menggunakan kit PCR TM One Step RT dengan SYBR green (Applied Biosystems , Grand Island, NY, AS). PCR kuantitatif waktu nyata dilakukan dengan menggunakan sistem PCR Real-Time Applied Biosystems 7500 (Applied Biosystems, Grand Island, NY, USA). Urutan primer dan urutan probe ditunjukkan pada Tabel1. Aliquot sampel cDNA dan jumlah yang sama dari cDNA GAPDH diamplifikasi dengan campuran master TaqMan® Universal PCR yang mengandung DNA polimerase sesuai dengan instruksi pabrik (Applied Biosystems, Foster, CA, USA). Kondisi PCR adalah 2 menit pada suhu 50°C, 10 menit pada suhu 94°C, 15 detik pada suhu 95°C, dan 1 menit pada suhu 60°C selama 40 siklus. Konsentrasi gen target ditentukan dengan menggunakan metode perbandingan Ct (angka siklus ambang batas pada titik silang antara plot amplifikasi dan ambang batas), sesuai dengan instruksi pabrik.

Harga FOB:US$0,5 - 9.999 / Potong

Jumlah Pesanan Minimum:100 Potongan/potongan

Kemampuan Pasokan:10000 Potongan/potongan per Bulan

Kirim email ke kami

Detail Produk

Label Produk

Osteoarthritis (OA) merupakan gangguan muskuloskeletal yang paling sering terjadi dan penyakit sendi degeneratif yang paling sering terjadi pada lansia.1]. OA adalah suatu kondisi yang sebagian disebabkan oleh cedera, hilangnya struktur dan fungsi tulang rawan, dan disregulasi jalur proinflamasi dan antiinflamasi.2,3]. Penyakit ini terutama mengenai tulang rawan artikular dan tulang subkondral pada sendi sinovial dan mengakibatkan kegagalan sendi, menyebabkan nyeri saat menahan beban termasuk berjalan dan berdiri.4].

Tidak ada obat yang dapat menyembuhkan OA, karena sangat sulit memulihkan tulang rawan yang sudah rusak.5]. Tujuan pengobatan adalah untuk menghilangkan rasa sakit, mempertahankan atau meningkatkan mobilitas sendi, meningkatkan kekuatan sendi, dan meminimalkan efek penyakit yang melumpuhkan. Pengobatan farmakologis OA bertujuan untuk mengurangi nyeri guna meningkatkan fungsi sendi dan kualitas hidup pasien. Meskipun kerusakan tulang rawan merupakan penyebab utama OA, namun degradasi kolagen merupakan kejadian mendasar yang menentukan perkembangan OA yang ireversibel dan berhubungan dengan inflamasi.6,7]. Perawatan dengan aktivitas anti-inflamasi dan kondroprotektif diharapkan dapat menghilangkan rasa sakit dan menjaga integritas matriks pada pasien OA.

Oleh karena itu, penurunan peradangan kemungkinan besar akan bermanfaat dalam penatalaksanaan OA. Penelitian terbaru menunjukkan peran protektif sumber daya herbal terhadap perkembangan OA, dalam hal mitigasi peradangan kondrosit dan kerusakan tulang rawan lebih lanjut, melalui kemampuannya untuk berinteraksi dengan jaringan terkait sendi, sehingga menghasilkan mitigasi nyeri sendi [8].

Akar dariSaposhnikovia divaricataSchischkin (Umbelliferae) telah banyak digunakan dalam pengobatan tradisional untuk pengobatan sakit kepala, nyeri, peradangan, dan arthritis di Korea dan Cina [9,10]. Beragam efek farmakologis dariSaposhnikovia divaricata(SD) juga mencakup sifat antiinflamasi, analgesik, antipiretik, dan antiartritis [9,11]. Sebuah penelitian baru-baru ini menunjukkan bahwa ekstrak SD chromone memiliki potensi efek antirheumatoid arthritis pada model tikus arthritis yang diinduksi kolagen [10]; Namun, hanya sedikit penelitian yang telah dilakukan untuk mendukung aktivitas antiinflamasi dan antiartritisSaposhnikovia divaricataekstrak (SDE).

Oleh karena itu, penelitian ini menyelidiki aktivitas anti-inflamasi dan antiosteoarthritis dari ekstrak etanol 70% SD. Pertama, efek anti-inflamasi SDE dievaluasisecara in vitrodalam sel RAW 264,7 yang diinduksi LPS. Selanjutnya, efek antiosteoartritis SDE diukur dengan menilai distribusi beban, degradasi tulang rawan artikular, dan respon inflamasi pada model tikus yang diinduksi OA yang diinduksi monosodium iodoacetate- (MIA-).