Minyak Saposhnikovia divaricata murni untuk pembuatan lilin dan sabun grosir diffuser minyak esensial baru untuk diffuser pembakar buluh

deskripsi singkat:

2.1. Penyusunan SDE

Rimpang SD dibeli sebagai herba kering dari Hanherb Co. (Guri, Korea). Bahan tanaman dikonfirmasi secara taksonomi oleh Dr. Go-Ya Choi dari Institut Pengobatan Oriental Korea (KIOM). Spesimen voucher (nomor 2014 SDE-6) disimpan di Herbarium Korea Standard Herbal Resources. Rimpang kering SD (320 g) diekstraksi dua kali dengan etanol 70% (dengan refluks 2 jam) dan ekstrak kemudian dipekatkan pada tekanan rendah. Dekok disaring, dikeringkan, dan disimpan pada suhu 4°C. Rendemen ekstrak kering dari bahan awal mentah adalah 48,13% (b/b).

2.2. Analisis Kuantitatif Kromatografi Cair Kinerja Tinggi (HPLC)

Analisis kromatografi dilakukan dengan sistem HPLC (Waters Co., Milford, MA, AS) dan detektor susunan fotodioda. Untuk analisis SDE dengan HPLC,O-standar glukosilcimifugin dibeli dari Institut Promosi Korea untuk Industri Obat Tradisional (Gyeongsan, Korea), dandetik-O-glukosilhamaudol dan 4′-O-β-D-glukosil-5-O-methylvisamminol diisolasi di laboratorium kami dan diidentifikasi melalui analisis spektral, terutama dengan NMR dan MS.

Sampel SDE (0,1 mg) dilarutkan dalam etanol 70% (10 mL). Pemisahan kromatografi dilakukan dengan kolom XSelect HSS T3 C18 (4,6 × 250 mm, 5μm, Waters Co., Milford, MA, AS). Fase gerak terdiri dari asetonitril (A) dan asam asetat 0,1% dalam air (B) dengan laju alir 1,0 mL/menit. Program gradien multitahap digunakan sebagai berikut: 5% A (0 menit), 5–20% A (0–10 menit), 20% A (10–23 menit), dan 20–65% A (23–40 menit). Panjang gelombang deteksi dipindai pada 210–400 nm dan direkam pada 254 nm. Volume injeksi adalah 10,0μL. Larutan standar untuk penentuan tiga kromon disiapkan pada konsentrasi akhir 7,781 mg/mL (prim-O-glukosilsimifugin), 31,125 mg/mL (4′-O-β-D-glukosil-5-O-metilvisamminol), dan 31,125 mg/mL (detik-O-glucosylhamaudol) dalam metanol dan disimpan pada suhu 4°C.

2.3. Evaluasi Aktivitas AntiinflamasiIn Vitro

2.3.1. Kultur Sel dan Perlakuan Sampel

Sel RAW 264.7 diperoleh dari American Type Culture Collection (ATCC, Manassas, VA, AS) dan ditumbuhkan dalam medium DMEM yang mengandung 1% antibiotik dan 5,5% FBS. Sel diinkubasi dalam atmosfer lembap dengan 5% CO2 pada suhu 37°C. Untuk menstimulasi sel, medium diganti dengan medium DMEM baru dan lipopolisakarida (LPS, Sigma-Aldrich Chemical Co., St. Louis, MO, AS) pada suhu 1°C.μg/mL ditambahkan dengan atau tanpa adanya SDE (200 atau 400μg/mL) selama 24 jam tambahan.

2.3.2. Penentuan Nitric Oxide (NO), Prostaglandin E2 (PGE2), Tumor Necrosis Factor-α(TNF-α), dan Produksi Interleukin-6 (IL-6)

Sel diperlakukan dengan SDE dan distimulasi dengan LPS selama 24 jam. Produksi NO dianalisis dengan mengukur nitrit menggunakan reagen Griess menurut penelitian sebelumnya [12]. Sekresi sitokin inflamasi PGE2, TNF-α, dan IL-6 ditentukan menggunakan kit ELISA (sistem R&D) sesuai petunjuk produsen. Efek SDE terhadap produksi NO dan sitokin ditentukan pada 540 nm atau 450 nm menggunakan Wallac EnVision.™pembaca mikroplat (PerkinElmer).

2.4. Evaluasi Aktivitas AntiosteoartritisDalam Hidup

2.4.1. Hewan

Tikus Sprague-Dawley jantan (umur 7 minggu) dibeli dari Samtako Inc. (Osan, Korea) dan ditempatkan dalam kondisi terkendali dengan siklus terang/gelap 12 jam di°C dan% kelembaban. Tikus diberi diet laboratorium dan airsepuasnyaSemua prosedur eksperimen dilakukan sesuai dengan pedoman National Institutes of Health (NIH) dan disetujui oleh Komite Perawatan dan Penggunaan Hewan Universitas Daejeon (Daejeon, Republik Korea).

2.4.2. Induksi OA dengan MIA pada Tikus

Hewan-hewan tersebut diacak dan ditugaskan ke kelompok perlakuan sebelum dimulainya penelitian (per kelompok). Larutan MIA (3 mg/50μL larutan garam 0,9%) disuntikkan langsung ke dalam ruang intra-artikular lutut kanan di bawah anestesi yang diinduksi dengan campuran ketamin dan xylazine. Tikus dibagi secara acak menjadi empat kelompok: (1) kelompok garam tanpa injeksi MIA, (2) kelompok MIA dengan injeksi MIA, (3) kelompok yang diobati dengan SDE (200 mg/kg) dengan injeksi MIA, dan (4) kelompok yang diobati dengan indometasin (IM-) (2 mg/kg) dengan injeksi MIA. Tikus diberikan SDE dan IM secara oral 1 minggu sebelum injeksi MIA selama 4 minggu. Dosis SDE dan IM yang digunakan dalam penelitian ini didasarkan pada dosis yang digunakan dalam penelitian sebelumnya [10,13,14].

2.4.3. Pengukuran Distribusi Berat Badan Kaki Belakang

Setelah induksi OA, keseimbangan awal kemampuan menahan beban kaki belakang terganggu. Alat uji ketidakmampuan (Linton Instrumentation, Norfolk, Inggris) digunakan untuk mengevaluasi perubahan toleransi menahan beban. Tikus ditempatkan dengan hati-hati ke dalam ruang pengukuran. Gaya menahan beban yang diberikan oleh kaki belakang dirata-ratakan selama 3 detik. Rasio distribusi berat dihitung dengan persamaan berikut: [berat pada kaki belakang kanan/(berat pada kaki belakang kanan + berat pada kaki belakang kiri)] × 100 [15].

2.4.4. Pengukuran Kadar Sitokinin Serum

Sampel darah disentrifugasi pada kecepatan 1.500 g selama 10 menit pada suhu 4°C; kemudian serum dikumpulkan dan disimpan pada suhu -70°C hingga digunakan. Kadar IL-1β, IL-6, TNF-α, dan PGE2 dalam serum diukur menggunakan kit ELISA dari R&D Systems (Minneapolis, MN, AS) sesuai dengan petunjuk pabrik.

2.4.5. Analisis RT-PCR Kuantitatif Real-Time

Total RNA diekstraksi dari jaringan sendi lutut menggunakan reagen TRI® (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, AS), ditranskripsi balik menjadi cDNA, dan diamplifikasi dengan PCR menggunakan kit PCR TM One Step RT dengan SYBR green (Applied Biosystems, Grand Island, NY, AS). PCR kuantitatif waktu nyata dilakukan menggunakan sistem PCR Waktu Nyata Applied Biosystems 7500 (Applied Biosystems, Grand Island, NY, AS). Urutan primer dan urutan probe ditunjukkan pada Tabel.1Alikuot cDNA sampel dan cDNA GAPDH dalam jumlah yang sama diamplifikasi dengan campuran induk PCR TaqMan® Universal yang mengandung DNA polimerase sesuai dengan petunjuk produsen (Applied Biosystems, Foster, CA, AS). Kondisi PCR adalah 2 menit pada suhu 50°C, 10 menit pada suhu 94°C, 15 detik pada suhu 95°C, dan 1 menit pada suhu 60°C selama 40 siklus. Konsentrasi gen target ditentukan menggunakan metode Ct komparatif (nomor siklus ambang batas pada titik persilangan antara plot amplifikasi dan ambang batas), sesuai dengan petunjuk produsen.

Harga FOB:US $0,5 - 9.999 / Potong

Jumlah Pesanan Minimum:100 buah/potongan

Kemampuan Pasokan:10000 Potongan/Potongan per Bulan

Kirim email ke kami

Detail Produk

Label Produk

Osteoarthritis (OA) merupakan gangguan muskuloskeletal yang paling sering terjadi dan penyakit sendi degeneratif yang paling umum pada lansia [1]. OA adalah suatu kondisi yang disebabkan sebagian oleh cedera, hilangnya struktur dan fungsi tulang rawan, dan disregulasi jalur proinflamasi dan antiinflamasi [2,3]. Penyakit ini terutama menyerang tulang rawan artikular dan tulang subkondral pada sendi sinovial dan menyebabkan kegagalan sendi, sehingga menimbulkan rasa nyeri saat menahan beban termasuk berjalan dan berdiri [4].

Tidak ada obat untuk OA, karena sangat sulit untuk memulihkan tulang rawan setelah rusak [5Tujuan pengobatan adalah untuk meredakan nyeri, mempertahankan atau meningkatkan mobilitas sendi, meningkatkan kekuatan sendi, dan meminimalkan efek disabilitas akibat penyakit. Pengobatan farmakologis OA bertujuan untuk mengurangi nyeri guna meningkatkan fungsi sendi dan kualitas hidup pasien. Meskipun destruksi tulang rawan merupakan penyebab utama OA, degradasi kolagen merupakan faktor fundamental yang menentukan progresi ireversibel OA yang berkaitan dengan peradangan [6,7]. Perawatan dengan aktivitas antiinflamasi dan kondroprotektif diharapkan dapat meredakan nyeri dan menjaga integritas matriks pada pasien OA.

Oleh karena itu, mengurangi peradangan kemungkinan besar akan bermanfaat dalam penanganan OA. Studi terbaru menunjukkan peran protektif sumber daya herbal terhadap perkembangan OA, dalam hal mengurangi peradangan kondrosit dan kerusakan tulang rawan lebih lanjut, melalui kemampuannya berinteraksi dengan jaringan terkait sendi, sehingga mengurangi nyeri sendi [8].

Akar dariSaposhnikovia divaricataSchischkin (Umbelliferae) telah banyak digunakan dalam pengobatan tradisional untuk pengobatan sakit kepala, nyeri, peradangan, dan radang sendi di Korea dan Cina [9,10]. Efek farmakologis yang beragam dariSaposhnikovia divaricata(SD) juga mencakup sifat antiinflamasi, analgesik, antipiretik, dan antiartritis [9,11]. Sebuah studi baru-baru ini menunjukkan bahwa ekstrak kromon SD memiliki potensi efek antirheumatoid arthritis pada model tikus artritis yang diinduksi kolagen [10]; namun, hanya sedikit penelitian yang dilakukan untuk mendukung aktivitas antiinflamasi dan antiartritis dariSaposhnikovia divaricataekstrak (SDE).

Oleh karena itu, penelitian ini menyelidiki aktivitas antiinflamasi dan antiosteoartritis dari ekstrak etanol 70% SD. Pertama, efek antiinflamasi SDE dievaluasi.in vitropada sel RAW 264.7 yang diinduksi LPS. Selanjutnya, efek antiosteoartritis SDE diukur dengan menilai distribusi beban, degradasi kartilago artikular, dan respons inflamasi pada model tikus OA yang diinduksi monosodium iodoasetat (MIA).